稳定表达Bcl-2蛋白的肝细胞癌细胞株的建立与鉴定

摘要：

目的为了探讨抗凋亡基因bcl-2在肝细胞癌（简称肝癌）细胞凋亡过程中的调节功能及其作用机制，建立稳定表达Bcl-2蛋白的肝癌细胞株. 方法提取含有人bcl-2基因的逆转录病毒真核表达载体pDOR-SB质粒，用限制性内切酶EcoRⅠ (酶切后经琼脂糖凝胶电泳鉴定. 用脂质体介导的基因转染法分别将pDOR-SB和pDOR质粒导入不表达Bcl-2蛋白的人肝癌细胞系HCC-9204细胞中，通过G-418筛选获得转入目的基因的阳性细胞克隆. 免疫细胞化学法检测Bcl-2蛋白的表达情况. 经多次用有限稀释法连续克隆化直至获得100 %稳定表达Bcl-2蛋白的肝癌细胞株. 结果琼脂糖凝胶电泳可见1.9 kb的bcl-2基因片断. 免疫细胞化学检测表明转染了pDOR-SB的HCC-9204细胞大部分有Bcl-2蛋白的表达，而转染了pDOR空载体或未转染的HCC-9204细胞均未见Bcl-2蛋白表达. 经过连续3次克隆化后转染pDOR-SB的HCC-9204细胞100 %表达Bcl-2蛋白. 结论成功地获得了稳定表达Bcl-2蛋白的肝癌细胞株，命名为HCC-bcl2.

关键词：基因、bcl-2、癌、肝细胞、转染、基因表达

所属期刊栏目：22

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：763-766