液氮保存对人主动脉瓣组织细胞活力的影响

摘要：

目的主要观察液氮（-196℃）保存1～24 mo不同时间段的瓣膜组织细胞活力及组织培养细胞生长情况的变化,为临床适用的人同种主动脉瓣的适宜保存期限提供实验依据. 方法选取（18～35）岁健康成年男性脑死亡30 min内取材的主动脉瓣膜20个. 依据保存时间分为10组，Ⅰ组为新鲜对照组, 取材后直接供实验用，Ⅱ～Ⅹ组为冷冻保存组,分别为冷冻保存1,3,6,9,12,15,18,21,24 mo的瓣膜，每组2个瓣膜共6个瓣叶. 冷冻保存组各组瓣膜缓慢降温（1℃*min-1）,液氮中保存，实验时进行快速复温. 瓣叶剪为细小组织块,一半置入培养瓶中做组织培养,相差显微镜下观察其组织细胞生长情况；另一半组织块用胰酶消化,光镜下做细胞计数并计算其细胞活力. 结果Ⅰ组的组织细胞活力最高(93.8%),Ⅱ～Ⅹ组细胞活力均较Ⅰ组明显减低(67.3% vs 93.8% P<0.05)；Ⅷ, Ⅸ,Ⅹ组细胞活力较Ⅱ～Ⅶ组瓣膜各组明显减低(52.4% vs 76.5% P<0.05). Ⅰ组组织细胞1 wk镜下可见,生长较快,4 wk时镜下细胞数较多；Ⅱ～Ⅶ组组织细胞2 wk镜下可见, 生长较Ⅰ组稍缓慢,4 wk时镜下细胞数减少；Ⅷ, Ⅸ, Ⅹ组细胞3 wk镜下可见,生长较慢,4 wk时镜下细胞数较Ⅰ组明显减少. 结论液氮保存对人同种瓣膜组织细胞活力有显著影响,其程度随保存时间增长而加重；液氮保存1～15 mo瓣膜组织细胞生长较新鲜瓣膜组稍晚,但组织细胞活力仍较高；液氮保存18～24 mo瓣膜组织细胞活力明显减低,组织细胞生长缓慢，因此瓣膜组织活性及瓣膜耐久性可能减低. 据此可认为, 人同种主动脉瓣的适宜保存期限为15 mo以内.

关键词：氮、低温保藏、主动脉瓣、细胞存活、细胞增殖能力、组织培养

所属期刊栏目：22

分类号：R65;R31

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：679-683