苦参碱诱导K562细胞凋亡相关基因bcl-6表达上调

摘要：

@@红白血病K562细胞增殖［2］，未见有关引起细胞凋亡及其机制的报道. 我们研究发现，苦参碱可诱导K562细胞凋亡相关基因bcl-6表达上调、增殖细胞核抗原（PCNA）表达受抑.
1　材料和方法
1.1　细胞培养　人红白血病细胞株K562接种于含100 mL·L-1胎牛血清的RPMI 1640培养液中，置于37℃、饱和湿度、50 mL·L-1 CO2孵箱内培养，3 d换液、传代1次.
1.2　药品和试剂　苦参碱(matrine)购自西安市天其植物化学药品公司（纯度>0.98，相对分子质量248.36）. 抗Bcl-6，PCNA单克隆抗体购自DAKO公司，Western blot检测试剂盒购自德国BOEHRINGER MANNHEIM公司.
1.3　苦参碱诱导K562细胞实验　将处于对数增长期K562细胞分为7组，分别接种于100 mL培养瓶内培养（每组105个），1组为空白对照，另6组细胞分别加入0.05, 0.1， 0.2， 0.4和0.5 g·L-1苦参碱诱导，每日观察细胞形态，并行细胞计数. 诱导第7日提取各组细胞总蛋白，于-20℃保存备用.
1.4　Bcl-6,PCNA检测及凋亡细胞电镜观察　将对照组及0.2 g·L-1苦参碱诱导组细胞总蛋白提取液定量为1 g·L-1，各取样品10 μL，采用Western blot试剂盒检测，按说明操作. 对照组及苦参碱诱导组细胞制作常规超薄切片，电子染色，EM-2000EX电镜观察.

关键词：苦参碱、K562细胞、bcl-6、凋亡、PCNA

所属期刊栏目：22

分类号：R733.7(肿瘤学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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