10.3321/j.issn:1000-2790.2001.03.010
改变部分TIR对EPO模拟肽8串联体表达的影响
目的 通过改变部分翻译起始区序列观察对EPO模拟肽基因8串联体表达的影响.方法 设计和人工合成了部分翻译起始区域(translationinitiation region,TIR)DNA序列,将该序列插入pBSEPOM8(含EPO模拟肽基因8串联体序列)的EcoRI和XbaI位点,经DNA测序确定正确重组质粒,再将EPO模拟肽基因8串联体(含改建的翻译起始区域)克隆到pBV220载体的EcoRI和BamHI位点,诱导表达.结果 DNA测序证明,人工合成的DNA序列已正确插入EPO模拟肽基因8串联体的翻译起始区域.该串联体基因插入pBV220载体后,经42℃诱导,在细菌裂解上清中出现一条相对分子质量为22×103(Mr)的新蛋白带,与EPO模拟肽基因8串联体的理论计算分子量相符合.经薄层扫描证明该蛋白带约占细菌蛋白总量的15%.结论 通过改变部分翻译起始区域起动了EPO模拟肽基因8串联体的翻译,使原来不表达的EPO模拟肽基因8串联体获得了较高水平的表达.
翻译起始区域、SD序列、EPO模拟肽、基因串联体
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Q78(基因工程(遗传工程))
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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