针对bcr-abl融合基因不同位点的三个单核酶体外切割活性的比较

摘要：

目的:针对bcr-abl融合基因设计并构建3个针对不同位点的特异性单核酶体外转录载体,通过体外切割试验比较其对bcr-abl融合基因的切割效率,为慢粒基因治疗打下基础.方法:①首先针对bcr-abl融合位点设计、合成3个相邻的锤头状核酶,将其定向克隆入改建的pDES载体中,构建3个单核酶体外转录载体并进行序列测定.②同时通过PCR方法扩增bcr-abl融合位点376 bp序列,克隆入pBluescript KS载体中构建融合基因体外转录载体,作为核酶体外作用的模板.③分别将核酶及模板进行体外转录及同位素标记,通过切割试验比较不同核酶的体外切割活性.结果:本文通过体外切割试验证实3个单核酶对bcr-abl融合基因的切割效率分别为54.6%,25.3%及3.6%,核酶1效率最高.结论:针对bcr-abl融合基因不同位点的核酶具有不同的切割效率.本试验结果为遴选、研制高效的bcr-abl特异性单核酶及多核酶,进一步开展慢性粒细胞白血病核酶基因治疗创造了条件.

关键词：慢性粒细胞白血病、bcr-abl、核酶

所属期刊栏目：20

分类号：R557.1(血液及淋巴系疾病)

资助基金：国家自然科学基金39670330

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：284-287