复合因素急性应激诱导肠道屏障功能障碍及其作用机制研究

摘要：

目的 研究复合因素急性应激对肠道屏障功能的影响,并探索相关作用机制.方法 20只7～8周龄的雄性C57BL/6小鼠(体质量20～22 g),用随机数表法分为对照(CON)组和模型(MOD)组,n=10.MOD组小鼠于24 h内先后给予4 h休息、15 h的睡眠剥夺、3 h的噪音(120 dB)/闪光(2 000± 500 lx)和2 h的强迫游泳运动(水温26±1℃、水深45 cm),建立复合因素急性应激模型;CON组小鼠置于恒温恒湿、正常昼夜节律的无噪音环境中不做任何处理.MOD组小鼠强迫游泳运动结束后,将小鼠麻醉采血,颈椎脱臼处死并取材.通过免疫酶联吸附实验试剂盒检测血清肠损伤标志物,HE染色法检测结肠组织形态变化,PAS染色检测肠道杯状细胞数目,免疫荧光、免疫组化和RT-qPCR法检测结肠组织屏障功能和炎症因子相关蛋白及基因表达,16S rRNA技术分析小鼠肠道菌群变化.结果 与CON组比较,MOD组小鼠血清肠道损伤标志物脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)、肠脂肪酸结合蛋白(Intestinal fatty acid binding protein,I-FABP)、连蛋白(Zonulin)明显升高(P＜0.05);HE 染色显示 MOD组小鼠肠道组织损伤明显;免疫荧光染色和RT-qPCR结果显示机械屏障相关分子紧密连接蛋白-1(Zona occludens 1,ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)表达显著降低(P＜0.05),免疫组化和PAS染色提示化学屏障相关杯状细胞数目及黏蛋白2(mucin2,Muc-2)、抗菌肽再生胰岛衍生蛋白3γ(regenerating islet derived-3γ,Reg3γ)、再生胰岛衍生蛋白 3β(regenerating islet derived-3β,Reg3β)显著降低(P＜0.05);肠道菌群β多样性显著改变,有害菌拟杆菌门、脱硫弧菌门显著增加,有益菌瘤胃球菌科、丹毒丝菌(norank_f_Erysipelotrichaceae)属、孪生球菌(Gemella)属、丹毒丝菌(Erysipelotrichaceae)属显著减少(P＜0.05);炎症相关肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素 6(interleukin-6,IL-6)以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平均显著增加(P＜0.05).结论 复合因素急性应激显著诱导小鼠肠道损伤和肠屏障功能障碍.

关键词：复合因素、急性应激、肠道屏障、机械屏障、化学屏障、微生物屏障

所属期刊栏目：46

分类号：R339.5;R363;R574(人体生理学)

在线出版日期：2024-01-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：73-83