川陈皮素在体内外模型中对肠干细胞增殖的影响

摘要：

目的 探讨在体内外模型中常用有效剂量川陈皮素(nobiletin,NOB)对肠道干细胞的调节作用.方法 构建小鼠结肠癌细胞系MC38的3D培养模型,加入不同浓度NOB,观察克隆死亡和存活.构建小鼠小肠类器官模型,在类器官培养体系中添加不同浓度的NOB,观察类器官的出芽和生长,利用MTT染色后的类器官成像进行面积和吸光值计算.在50、100 μmol/L浓度NOB干预体系中不同时间撤掉NOB,观察类器官生长.在50 μmol/L浓度NOB处理类器官的体系中分别加入R-spondin1、CHIR99021加强Wnt通路激活信号,观察类器官的生长.对C57/B6J小鼠灌胃不同浓度NOB,连续给药4 d,观察肠道隐窝和绒毛长度比,观察隐窝细胞凋亡,以及隐窝底部干细胞龛中Olfm4/BrdU染色阳性的细胞数量.结果 与对照组相比,50 μmol/L NOB即可显著促进肿瘤细胞MC38成球后死亡,显著降低克隆形成率(P＜0.001).与对照组相比,NOB从50 μmol/L起可以显著抑制肠类器官的出芽,50～200 μmol/L NOB可以显著抑制类器官的生长(P＜0.001),并且具有剂量依赖效应;NOB撤药后在50 μmol/L时肠类器官生长容易恢复,在100 μmol/L时难以恢复到正常水平.增强Wnt通路的激活可以部分挽救NOB对肠类器官的抑制作用.在体给予高于常用浓度的NOB不能诱导肠隐窝细胞凋亡,不影响肠干细胞的数目和增殖,不影响隐窝和绒毛比.结论 NOB具有抑制正常肠干细胞的能力,可能通过调控干细胞相关通路如Wnt发挥作用,但其在在体不能发挥抑制干细胞增殖的效应;这提示NOB在常规浓度应用的安全性,同时提醒对NOB在在体肿瘤模型中发挥的抑制作用需要进行更深入的评估.

关键词：川陈皮素、小肠干细胞、小肠类器官、细胞增殖、在体

所属期刊栏目：45

分类号：R285.5;R322.45;R329.28(中药学)

在线出版日期：2023-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：2195-2205