10.16016/j.1000-5404.202107102
膜联蛋白A6促进神经祖细胞定向少突胶质细胞分化发育的机制研究
目的 探讨膜联蛋白A6(annexin A6,AnxA6)调控神经祖细胞(neural progenitor cells,NPCs)定向少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)分化的作用机制.方法 构建AnxA6基因敲减(AnxA6敲减组)和过表达(AnxA6过表达组)病毒载体,以空载体作为对照组.运用qRT-PCR、Western blot、免疫荧光染色、活细胞钙成像等技术,对比检测AnxA6敲减与过表达后,体外培养的NPCs胞内Ca2+的动态变化差异及其对定向分化转录因子Olig2(定向OLs)、Hes1、Ascl1等表达的影响,评估AnxA6对NPCs分化过程的影响.结果 与对照组相比,AnxA6敲减组未见明显AnxA6蛋白条带(P<0.05),而AnxA6过表达组阳性蛋白条带光密度值显著升高(P<0.01);NPCs分化1 d后在静息状态下,AnxA6过表达组细胞可见胞内Ca2+自发振荡的频率和振幅均高于对照组和AnxA6敲减组;在NPCs分化3 d的细胞中,可见AnxA6过表达组Olig2 mRNA表达升高,而Hes1、Ascl1 mRNA则表达减少;Olig2荧光阳性细胞的百分率升高,CNPase荧光信号代表的髓鞘分布增大;同时突起形成相关细胞骨架因子Vimentin、Fyn mRNA的表达显著上调(P<0.05).结论 过表达AnxA6不仅能增强NPCs分化早期细胞内Ca2+的动力变化,还促进OLs定向转录因子的表达,加快髓鞘形成.
膜联蛋白A6;神经祖细胞;少突胶质细胞;钙离子;细胞分化;髓鞘形成
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R322.85;R329-33;R329.25(人体形态学)
国家自然科学基金面上项目31471148
2021-12-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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