抑制HBV核心启动子转录活性的化合物筛选与鉴定

摘要：

目的 构建靶向核心启动子转录的稳定细胞系,筛选影响乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转录的药物.方法 利用HepG2细胞,以重组慢病毒的方式构建由HBV核心启动子驱动的Gaussia荧光素酶稳定表达细胞系(HepG2-Pcore-Gluc).通过检测荧光素酶活性来反映核心启动子的活性变化情况.在HBV复制细胞模型中,通过Southern blot、荧光定量PCR等进一步评估经多轮筛选得到的化合物对HBV RNA、HBV DNA的影响.结果 利用HepG2-Pcore-Gluc细胞模型筛选1450种小分子化合物,第1轮筛选到41种化合物,能影响荧光素酶活性2倍以上.将这41种化合物进行第2轮剂量依赖性测试,得到2种化合物:逆转素(Reversine)、SCH58261.进一步验证发现:Reversine在瞬时转染HBV1.3倍体的HepG2和HepG2.2.15细胞中,能够有效降低HBV RNA、HBV DNA以及HBeAg、HBsAg的水平.结论 建立了一种新型、高效的抗乙肝药物筛选细胞模型(HepG2-Pcore-Gluc),利用该模型筛选到一种新型分子Reversine,该分子可以通过抑制HBV核心启动子的转录活性来抑制HBV RNA的转录.

关键词：逆转素、乙型肝炎病毒、核心启动子、细胞模型、药物筛选

所属期刊栏目：43

分类号：R373.21;R965.1;R978.7(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金面上项目;重庆市自然科学基金面上项目;成都中医药大学杏林学者研究基金

在线出版日期：2021-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：1192-1203