血小板微囊泡对人微血管内皮细胞功能的影响

摘要：

目的 探讨血小板微囊泡(platelet microvesicles,PMVs)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMECs)功能的影响.方法 取柠檬酸钠抗凝的健康人全血分离血小板,采用二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)激活血小板产生PMVs,然后以不同浓度(10、20、50 μg/mL)的PMVs作用于HMECs,并设立台式液作为空白对照组(control,Con组)和不含PMVs的上清组(supernatants,Sup组).ELISA检测HMECs培养上清中血栓素A2(thromboxane A2,TXA2)和前列腺素I2(prostaglandin I2,PGI2)的稳定代谢产物TXB2和6-keto-PGF1α、细胞间黏附分子-1(intercellularadhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和E-选择素(E-selectin)的水平.Western blot检测HMECs中内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的磷酸化水平.荧光探针检测HMECs中一氧化氮(nitric oxide,NO)含量.采用流式细胞仪定量检测HMECs培养上清中内皮微囊泡(endothelial microvesicles,EMVs)的含量.结果 与Con组和Sup组比较,PMVs可使HMECs培养上清TXB2的水平升高(P＜0.05),6-keto-PGF1α的水平降低(P＜0.05),均呈时间和剂量依赖性;PMVs可使HMECs中eNOS的磷酸化水平和NO含量显著下降,ET-1水平升高;经PMVs作用后,HMECs培养上清中ICAM-1、VCAM-1和E-selectin的表达水平亦显著升高(P＜0.05).与Con组和Sup组比较,50 μg/mL PMVs作用于HMECs 24 h后,培养上清中EMVs的水平显著增加(P＜0.05).结论 PMVs可导致微血管内皮细胞的功能紊乱和损伤.这可能是血小板参与微循环功能障碍发生的重要机制之一.

关键词：血小板微囊泡、微血管内皮细胞、血栓素A2、内皮型一氧化氮合酶、血管细胞黏附分子-1、内皮微囊泡

所属期刊栏目：42

分类号：R322.13;R329.28;R331.143(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81470561,81770433

在线出版日期：2020-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：758-764