WalK (S221P)突变影响万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌毒力的作用

摘要：

目的 探讨WalK(S221P)突变对万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌(vancomycinintermediate Staphylococcus aureus,VISA)毒力的影响及其机制.方法 采用转录组测序比较VISA菌株XN108及其WalK(S221P)回复菌株K65的毒力基因表达差异,利用RT-qPCR检测菌株毒力基因的表达变化,溶血实验比较菌株的溶血能力.采用同源重组技术在金葡菌中引入WalK(S221P)突变,E-test 检测菌株的耐药性.凝胶阻滞实验(EMSA)检测WalKR对靶基因调控区的结合能力.结果 转录组测序结果显示,K65中多种重要毒力因子基因的表达上调(P＜0.01),调控系统Agr的活性增强,溶血能力恢复.将WalK(S221P)突变引入USA300菌株后,其耐药性升高,毒力因子表达水平及溶血活性降低;EMSA证实WalKR对金葡菌Agr有直接调控作用;敲除agrA基因后,引入WalK(S221P)突变仍可使USA300agrA对万古霉素的耐药性升高,但毒力基因的表达水平及溶血活性改变不显著.结论 WalK(S221 P)突变影响VISA毒力是通过Agr实现的,该突变导致WalKR的活性降低,激活Agr的能力下降,最终影响VISA菌株的毒力.

关键词：万古霉素中等耐药金黄色葡萄球菌、二元调控系统、WalKR、WalK(S221P)突变、毒力

所属期刊栏目：42

分类号：R372;R378.11;R394.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：军队生物安全专项;国家自然科学基金面上项目

在线出版日期：2020-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：219-228