共培养体系下小鼠巨噬细胞RAW264.7与骨骼肌细胞C2C12间的相互作用

摘要：

目的 建立巨噬细胞RAW264.7和成肌细胞C2C12共培养体系,检测该共培养体系下培养不同时长RAW264.7和C2C12间的相互作用.方法 Transwell小室内以成肌分化培养基共培养RAW264.7和C2C12,相差显微镜观察细胞形态,共培养1、3、5d后,CCK-8法检测细胞增殖能力,Western blot法检测Myf5、MyoD、myogenin、iNOS和Arg-1蛋白水平,ELISA法检测培养细胞上清液IL-1β和IL-10分泌量.结果 ①共培养对C2C12的影响:加快成肌分化进程、促进多核肌管形成,与同时间点对照组相比,共培养1d即抑制Myf5蛋白表达(P＜0.05),增加MyoD(P＜0.05)和myogenin (P＜0.01)蛋白表达;共培养3d抑制Myf5蛋白表达(P＜0.01),增加MyoD蛋白表达(P＜0.01);共培养5d降低细胞活性(P＜0.05)并降低Myf5蛋白表达(P＜0.01),增加肌管面积(P＜0.01).②共培养对RAW264.7的影响:共培养对细胞形态无明显影响,与同时间点对照组相比,共培养1d抑制iNOS蛋白表达(P＜0.01)和IL-1β分泌(P＜0.05),增加Arg-1蛋白表达(P＜0.01);共培养3d抑制iNOS蛋白表达和IL-1β分泌(P＜0.01),增加Arg-1蛋白表达(P＜0.01)和IL-10分泌(P＜0.05);共培养5d细胞簇集更加明显,促进细胞增殖(P＜0.05),抑制iNOS蛋白表达和IL-1β分泌(P＜0.01),增加IL-10分泌(P＜0.05).结论 C2C12和RAW264.7共培养促进成肌细胞的成肌分化以及巨噬细胞的增殖和M2型极化.

关键词：成肌细胞、巨噬细胞、细胞共培养、成肌分化、极化表型

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分类号：R329.2;R329.4;R339.4(人体形态学)

资助基金：江苏省高校自然科学研究面上项目18KJB180013

在线出版日期：2019-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1939-1946