10.16016/j.1000-5404.201811221
刃天青法检测mtDNA缺失C6ρ0细胞的活力
目的 建立以刃天青为氧化还原指示剂测定mtDNA被完全清除的大鼠胶质瘤C6细胞(C6ρ0)增殖及活力的方法,并对其有效性进行验证.方法 取对数生长期的C6ρ0细胞,采用刃天青法比较不同细胞数量、刃天青浓度、孵育时间对荧光强度的影响,优化测定C6ρ0细胞活力的条件.比较MTT法和刃天青法测定C6ρ0和C6细胞活力的灵敏性,并以天然化合物熊果酸对C6ρ0和C6细胞活力的影响对该方法进行验证.结果 C6ρ0细胞数为0~30 000/孔,25 μg/mL刃天青培养基避光孵育1~4h,细胞数量与荧光强度呈良好线性关系,灵敏性高于MTT法.熊果酸0~50 μmol/L对C6ρ0和C6细胞具有增殖抑制作用,且增殖抑制率差异有统计学意义(P<0.05),IC50分别为20.82、14.62 μg/mL.结论 刃天青法灵敏、简单、安全无毒、经济便宜、重复性好,特别适用于生长代谢缓慢的细胞系,可用于其细胞增殖测定、活力分析及化合物细胞毒的高通量筛选.
刃天青、神经胶质瘤C6细胞、C6ρ0细胞、细胞活力、熊果酸
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R329-33;R730.264;R914.4(人体形态学)
中国科学院战略性先导科技专项A类XDA12040320
2019-07-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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