10.16016/j.1000-5404.201601174
LETM1在肝癌中的表达及其对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨亮氨酸拉链EF-hand结构域跨膜蛋白1(leucine bnzipper/EF-hand-containing transmembrane proteinl,LETMl)在肝癌组织中的表达水平及通过RNAi技术靶向LETM1基因对肝癌细胞株SMMC-7721的增殖及凋亡的影响.方法 采用免疫组织化学方法、Western blot检测重庆医科大学附属第一医院肝胆外科2012年9月至2013年4月共60例肝癌组织及其癌旁肝组织中LETM1蛋白表达情况.Western blot检测人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2及人正常肝细胞株LO2中的LETM1蛋白表达情况.将LETM1 siRNA经Lipofectamine 2000TM脂质体转染SMMC-7721(实验组为si-LETM1、对照组为si-NC),实时荧光定量PCR及Western blot分别检测LETM1转染后肝癌SMMC-7721细胞株中LETM1 mRNA及蛋白的表达.CKK-8及流式细胞术检测LETM1低表达对肝癌细胞增殖及细胞凋亡的影响.结果 ①免疫组织化学结果显示,LETM1蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为73.33％(44/60),明显高于癌旁组织中的表达率28.33％(17/60,P＜0.01);Western blot检测结果显示,LETM1蛋白在肝癌组织中的表达相对量(2.335±0.221)较癌旁组织(1.386±0.081)明显增高(P＜0.01).②LETM1蛋白表达与肝癌肿瘤直径及门静脉侵犯有关(P＜0.05),而与肝癌患者性别、年龄、甲胎蛋白、HBsAg、Edmondson分级及TNM分期无关(P＞0.05).③LETM1蛋白在SMMC-7721及HepG2中的表达相对量[(分别为(1.447±0.149)、(1.190 ±0.113)]均明显高于LO2[(0.918 ±0.027),P＜0.05].④si-LETM1组与si-NC组和空白组比较,si-LETM1组细胞的增殖受到抑制(P＜0.01),尤以72 h及96 h最为显著;si-LETM1早期细胞凋亡数(14.6±2.3)％与si-NC早期细胞的凋亡数(6.3±0.7)％比较,差异有统计学意义(P=0.04).结论 LETM1蛋白在肝癌组织的表达显著高于癌旁组织;基因沉默LETM1后的肝癌细胞其增殖能力明显减弱,凋亡能力明显增强.
肝细胞癌、RNA干扰、LETM1、细胞增殖、凋亡
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R394.3;R730.23;R735.7
国家自然科学基金青年科学基金项目81301656;国家临床重点专科建设资助项目[2012]649号;重庆市渝中区科技计划项目20140109;Supported by the National Natural Science Foundation for Young Scholars of China 81301656,the National Clinical Key-descipline Construction Program of China 2012-649 and the Science and Technology Project of Yuzhong District of Chongqing20140109.
2016-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1942-1947
