10.16016/j.1000-5404.201504151
以支架为载体的TRADD基因慢病毒转染对食管良性狭窄的抑制作用
目的 观察TRADD基因慢病毒涂层食管支架置入后,TRADD基因对犬食管良性狭窄黏膜的转染效果及对食管狭窄的抑制作用.方法 采用随机数字表法,将15只实验犬随机平均分为实验组、对照组及空白组,采用氩离子凝固器制作良性食管狭窄模型,分别置入GFP-TRADD基因慢病毒涂层带膜食管支架、GFP-慢病毒涂层食管支架、普通带膜食管支架,1周后观察支架脱落情况,并取出支架,2、3、4周胃镜下观察狭窄程度.4周后处死实验犬,对狭窄食管组织行病理、Masson三色染色法、免疫荧光检查,分别采用Western blot检测TRADD蛋白在3组食管组织中的表达,同时检测collagen Ⅰ、collagenⅢ、α-SMA 3种蛋白在食管组织中表达情况.结果 置入食管支架1周后,胃镜检查见实验组实验犬带膜支架全部移位进入胃,对照组和空白组实验犬分别有2、3只实验犬其带膜支架移位进入胃中,胃镜取出所有实验犬未移位食管支架.此后每周测量其食管狭窄处直径,可见对照组及空白组实验犬再次出现食管明显狭窄,而实验组再狭窄较轻.采用重复测量设计的多因素方差分析具有统计学差异(P<0.01).食管狭窄组织HE染色结果表明空白组及对照组肉芽组织及纤维组织增生,而实验组肉芽组织及纤维组织增生较不明显.Masson染色结果表明实验组胶原纤维较空白组、对照组明显减少(P<0.05).免疫荧光镜检查可见绿色荧光蛋白在黏膜下组织,表明TRADD基因慢病毒及慢病毒均在食管黏膜下生长.Western blot检测实验组可检测GFP-Tradd-Flag蛋白,而空白组和对照组未检测出该蛋白.Western blot检测显示实验组collagen Ⅰ、collagenⅢ、α-SMA 3种蛋白较其他两组明显降低(P<0.05).结论 以支架作为载体可成功将TRADD慢病毒转入食管黏膜组织中,可抑制狭窄部位组织增生,减少食管狭窄部位再狭窄发生.
TRADD、慢病毒、食管支架、食管良性狭窄
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R394.1;R459.9;R571.105
Supported by the General Program of National Natural Science Foundation of China 81070384,81470907.国家自然科学基金面上项目81070384,81470907
2015-10-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1806-1812