microRNA 26b-5p靶向下调p300对人脐带间充质干细胞的增殖作用

摘要：

目的 探讨潜在microRNA靶向下调p300表达水平对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)增殖的影响.方法 通过双荧光素酶报告基因(Firefly/Renilla Luciferase)系统筛选出作用于p300 3 ' UTR的目标microRNA,mimic转染UC-MSCs后RT-qPCR检测miRNA表达水平的变化,Western blot检测p300蛋白水平变化,RT-qPCR和Western blot 检测多潜能转录因子表达水平的变化,MTT法检测UC-MSCs增殖能力的变化,并比较克隆形成能力的差异.结果 证实mir 26b-5p通过不完全互补配对结合p300的3'UTR区,显著降低了荧光素酶的相对活性(P ＜0.05);mir 26b-5p mimic转染后抑制p300蛋白表达水平(P＜0.05),并下调Nanog基因和蛋白表达水平(P＜0.05);mir 26b-5p mimic转染后UC-MSCs的增殖受到抑制(P＜0.05),克隆形成能力下降(P＜0.05).结论 UC-MSCs高表达mir 26b-5p能够显著抑制p300蛋白表达和干性相关基因Nanog的表达,并且抑制UC-MSCs的增殖能力和克隆形成能力.

关键词：人脐带间充质干细胞、转录共激活因子p300、mir 26b-5p、Nanog

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分类号：R329.2;R394-33;R394.2(人体形态学)

资助基金：Supported by the General Program of National Natural Science Foundation of China 81371718 and the Project of Science and Technology Research of Chongqing Municipal Education Committee KJ110301.国家自然科学基金面上项目81371718;重庆市教委科学技术研究项目KJ110301

在线出版日期：2016-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1614-1618