P364L突变降低UGT1A1酶对非结合胆红素的催化活性

摘要：

目的 研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1的P364L突变型(e.1091 C＞T)对催化非结合胆红素葡糖醛酸化的影响.方法 构建含有UGT1A1编码序列的野生型和P364L突变型质粒,转染HEK293细胞,表达野生型与突变型蛋白;Western blot验证野生型和P364L突变型蛋白表达情况;超声裂解细胞提取表达蛋白;设计两组反应,野生型为对照组,P364L突变型为实验组,分别催化非结合胆红素反应,HPLC定量检测两组中非结合胆红素浓度变化情况.结果 对照组中非结合胆红素的浓度随着时间的延长呈逐渐下降的趋势,而结合胆红素的浓度随时间延长逐渐升高;实验组中非结合胆红素浓度下降程度远小于对照组,未见明显的结合胆红素峰值;反应30 min时计算酶的活性P364L突变型为野生型的14.2％.结论 突变酶UGT1A1-P364L催化非结合胆红素能力较野生型明显降低.

关键词：尿苷二磷酸葡糖醛酸基转移酶1A1、胆红素、葡糖醛酸化、突变体

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分类号：R322.48;R345;R394.3(人体形态学)

在线出版日期：2015-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1017-1021