RNA干扰HSP27基因表达对膀胱逼尿肌细胞收缩特性的影响

摘要：

目的 探讨热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)低表达对体外培养人膀胱逼尿肌细胞(bladder smooth muscle cells,BSMCs)肌动蛋白骨架结构及其收缩功能的影响.方法 构建HSP27基因干扰慢病毒载体作用于BSMCs后,Western blot检测其抑制HSP27表达水平和干扰效率;通过鬼笔环肽荧光染色、Western blot检测BSMCs内F/G-actin比值检测等方法观察,干扰HSP27表达对BSMCs肌动蛋白骨架形态结构和聚合状态的影响;构建离体BSMCs三维培养模型,检测HSP27低表达对膀胱逼尿肌细胞收缩力的影响.结果 成功构建HSP27干扰质粒pGreenPuro-sh-HSP27,慢病毒载体高效感染BSMCs;与正常对照组比较,HSP27干扰组BSMCs细胞内肌动蛋白骨架结构紊乱和皱缩,检测F/G-actin比值(0.116 ±0.001)亦较正常BSMCs (8.717 ±0.500)明显下降(P＜0.05);正常BSMCs三维培养模型在80 mmol/L KCl刺激下可检测到的最大收缩力为(8.4 ±0.6)mg显著大于HSP27干扰组[(3.8±0.2)mg,P＜0.05].结论 HSP27低表达状态可导致BSMCs肌动蛋白结构变化并导致其收缩功能受损.

关键词：热休克蛋白27、肌动蛋白、逼尿肌细胞、膀胱收缩功能障碍

所属期刊栏目：37

分类号：R322.62;R341;R394.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金81000288,81270845Supported by the National Natural Science Foundation of China 81000288,81270845

在线出版日期：2015-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：500-504