重组人p66Shc腺病毒抑制HeLa细胞增殖的机制研究

摘要：

目的 探讨重组人p66Shc腺病毒(Adeno X-p66Shc)对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用及机制.方法 MTT法检测细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)生成;ELISA检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量;Annexin V-FITC/PI荧光染色检测细胞凋亡率;Western blot检测相关蛋白表达;免疫共沉淀检测p66Shc与p53之间相互作用.结果 重组人p66Shc腺病毒呈剂量依赖性地抑制HeLa细胞增殖(P＜0.05),而N-乙酰半胱氨酸能够阻断重组人p66Shc腺病毒的作用.p66Shc能引起细胞ROS水平显著上升(P＜0.05),同时伴随8-OHdG含量的升高(P＜0.05);p66Shc能引起p53蛋白和CyclinB1蛋白表达及p53磷酸化修饰(p-p53)显著升高(P＜0.05),但免疫共沉淀实验结果显示p66Shc与p53并非直接结合,提示p66Shc通过其他信号分子间接调控p53的表达及活性.结论 重组人66Shc腺病毒通过使HeLa细胞ROS水平上升,引起DNA氧化损伤,从而诱导p53表达及其磷酸化修饰升高抑制HeLa细胞增殖.

关键词：p66Shc、HeLa细胞、活性氧、p53

所属期刊栏目：36

分类号：R73-362;R730.23;R737.33(肿瘤学)

资助基金：Supported by the National Natural Science Foundation of China 81001439;国家自然科学基金81001439

在线出版日期：2014-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1991-1995