基底硬度对肝细胞胞间粘附复合物稳定性的影响
目的 通过比较汇合生长肝细胞(L02)对不同硬度基底(3.6、10 kPa和30 kPa)的响应,探查细胞间粘附复合物稳定性差异的成因.方法 运用实时显微拍摄观察L02细胞在不同硬度基底上的形态特征;采用免疫荧光染色技术检测细胞肌动蛋白骨架构象和β-连环蛋白表达分布;应用Western blot方法检测β-连环蛋白的表达及其磷酸化水平.结果 ①不同硬度基底上汇合生长L02细胞间粘附复合物稳定性不同,在乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)作用下随基底硬度增加,细胞分离时间缩短;②汇合生长L02细胞在软基质上肌动蛋白骨架成皮质下环,β-连环蛋白分布于细胞连接处.随着基底硬度增大,细胞骨架环变得不完整,胞内骨架呈放射状分布,β-连环蛋白弥散分布于细胞质中;③随基底硬度增加L02细胞膜上β-连环蛋白表达显著降低(P<0.01),细胞质中磷酸化的p-β-连环蛋白(Tyr654)的表达量显著增加(P<0.01).结论 基底硬度影响肝细胞粘附复合物稳定性,基底硬度越大复合物稳定性越差,这与基底硬度增加导致的p-β-连环蛋白(Tyr654)表达量增高有关.
肝细胞、基底硬度、粘附复合物、β-连环蛋白
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R318;R322.41;R341(医用一般科学)
the General Program of National Natural Science Foundation of China31270990;the Innovation and Attracting Talents Program for College and University"111" Project B06023.国家自然科学基金面上项目31270990;国家111计划资助项目B0623
2013-11-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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