表达SDF-1/HOXB4融合基因的间充质干细胞对造血干细胞体外扩增及干性维持的作用

摘要：

目的 构建SDF-1、HOXB4和SDF-1/HOXB4融合基因腺病毒表达载体,转染体外培养的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),比较其对CD34+细胞体外扩增及干性维持的影响.方法 全基因合成SDF-1/HOXB4基因序列,以其为模板,经PCR、酶切及测序鉴定,构建表达SDF-1、HOXB4和SDF-1/HOXB4的3种腺病毒载体,转染至293A细胞进行包装和病毒滴度测定,并转染体外培养的MSCs,分别为SDF-1组、HOXB4组和S-H组,转染空腺病毒载体的为阴性对照,转录水平及蛋白水平检测MSCs中外源基因表达.4组MSCs和CD34+细胞共培养7d,计数细胞并检测其CD34+表达.结果 测序表明3种腺病毒载体构建成功,在293A细胞中成功包装并获取病毒,RT-PCR和Western blot检测3个基因在MSCs细胞中稳定高表达,MSCs和CD34+细胞共培养,扩增细胞数目SDF-1组(9.52±2.24)、S-H组(8.11±2.34)显著高于对照组(4.85±2.53,P＜0.05),S-H组(CD34+表达为1.85％)较SDF-1组(1.20％)、HOXB4组(1.28％)更利于CD34+细胞干性维持.结论 表达SDF-1/HOXB4融合基因的MSCs对CD34+细胞体外扩增及干性维持作用更好.

关键词：腺病毒载体、间充质干细胞、造血干细胞、共培养、融合蛋白

所属期刊栏目：35

分类号：R329.2;R394-33;R394.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目30970868

在线出版日期：2013-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：589-594