沉默乙酰肝素酶基因对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭能力的影响
目的 观察沉默乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖及侵袭能力的影响.方法 构建针对HPA基因的shRNA慢病毒载体,感染人卵巢癌SKOV3细胞.实验设计分为未转染组、实验转染组(选择3个靶点设计HPA-shRNA-1、HPA-shRNA-2、HPA-shRNA-3序列)、空白转染组；转染后,采用荧光定量PCR、Western blot方法检测HPA在基因水平和转录后蛋白水平的沉默效率；使用流式细胞仪检测细胞周期变化,CCK-8法检测细胞增殖情况,基质凝胶侵袭实验检测细胞侵袭能力变化.结果 ①构建的shRNA慢病毒载体感染卵巢癌SKOV3细胞后,见HPA-shRNA-1和HPA-shRNA-2序列的HPA基因和蛋白水平均显著下降(P＜0.05),而HPA-shRNA-3序列在其表达上无降低,为无效转染序列；②实验转染组中有效转染序列HPA-shRNA-1、HPA-shRNA-2组中均见细胞G1期比例增加[分别为(69.69±3.87)％、(66.29±4.06)％],细胞增殖受到抑制[分别为( 1.77±0.13)、(1.74±0.27)],穿膜细胞数显著减少[分别为(22.40±5.02)、(23.42±5.72)],与未转染组及空白转染组之间相比有明显差异(P＜0.05).结论 干扰HPA基因后,对卵巢癌细胞的增殖及侵袭能力有明显的抑制作用,其作用机制与HPA的基因和蛋白表达下调有关.
沉默基因、乙酰肝素酶、卵巢癌、肿瘤浸润
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R394.3;R73-362;R737.31
2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
2361-2365
