人脐血CD34+细胞在NOD/SCID小鼠上有效重建造血系统
目的 探讨人脐血CD34+造血干细胞在非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷(no obese diabetic/severe combined Immunodeficiency,NOD/SCID)小鼠模型上造血重建的作用.方法 利用密度梯度离心法,从新鲜脐血中分离出单个核细胞,利用免疫磁珠分选法筛选CD34+造血干细胞,经尾静脉输注入经亚致死剂量照射后的NOD/SCID小鼠体内,移植后3、7、10、14 d分别用断尾法取小鼠外周血,血常规计数外周血动态变化情况;移植后4、6、8、10周,取其外周血,运用PCR法检测外周血中人特异性Alu基因的表达情况.结果 免疫磁珠分选得到的CD34+细胞浓度达91.2%,照射后小鼠骨髓腔内有核细胞和巨细胞数量明显减少或消失,达到清髓目的.移植后第3天移植组小鼠外周血各系细胞均明显低于正常组(P<0.01),移植后第7天,移植组小鼠外周血象开始恢复,明显高于阴性对照组[白细胞:(3.90±0.53)×109/L vs (1.30±0.18)×109/L,血红蛋:(139.8±5.0)g/L vs (79.8±11.0)g/L,白血小板:(253.0±17.5)×109/L vs (52.0±6.9)×109/L,(P<0.01)],移植后第10天,移植组小鼠外周血象恢复到辐照前水平,与正常组无差别.移植4周后,PCR方法 在小鼠外周血中可检测到人特异Alu基因序列,未移植组小鼠照射后2周内全部死亡.结论 经照射后的NOD/SCID小鼠通过人脐血CD34+细胞植入可建立起人鼠嵌合模型.NOD/SCID小鼠经照射后,不破坏骨髓造血微环境及造血基质,可用于异基因细胞移植模型.人脐血CD34+细胞移植入NOD/SCID小鼠,其造血系统能有效重建.
人脐血、NOD/SCID小鼠、CD34+干细胞、造血重建
33
R-332;R331.2;R733(医学研究方法)
贵州省科技厅黔科合计2008-1003;遵义市"15851"人才工程项目市15851人才办2008-9;贵州省教育厅培育项目黔科教2009-113
2011-07-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1136-1140