CRH对腹腔巨噬细胞分泌IL-10的影响及其信号机制

摘要：

目的 研究促肾上腺皮质激素释放激素(corticotrophin-releasing hormone,CRH)对大鼠腹腔巨噬细胞分泌白介素-10(interleukin-10,IL-10)的影响及其信号转导机制.方法 将原代培养的大鼠腹腔巨噬细胞分为正常对照组、CRH组、CP+CRH组、HL+CRH组、H89+CRH组以及PKAi+CRH组.其中正常对照组仅加入新鲜RPMI1640培养液2 ml;CRH处理组,加入含CRH终浓度为10~(-9) mol/L的培养液2 ml;后4组在分别用CRHRI选择性阻断剂CP-154526(5×10~(-4) mol/L)、CRHR1/2非选择性阻断剂α-helical CRH9-41(10~(-6)mol/L)、Ac抑制剂H89(10~(-6)mol/L)和PKA抑制剂PKAi(6-22)amide(10~(-4)mol/L)预孵育2 h后,加入含终浓度为10~(-9)mol/L的CRH培养液,再分别加入CRH(终浓度为10~(-9)mol/L)刺激.各组分别于CRH刺激后0.5、1、2、4、8 h收集培养皿中的上清液,应用ELISA方法 检测IL-10的含量.结果 正常对照组巨噬细胞分泌IL-10的含量为(29.41±3.10)μg/g.CRH组IL-10含量呈现双峰,在1、4 h达到高峰,分别为(53.15±7.98)、(46.01±1.70)μg/g,与CRH组0.5 h相比差异均非常显著(P<0.01),接近正常对照组的2倍(P<0.01).CP+CRH组与HL+CRH组IL-10含量在1、4 h均明显低于CRH组(P<0.01),并接近正常对照组水平.但在8 h时明显增加,显著高于正常对照组(P<0.05)和CRH组(P<0.05).且两组之间IL-10含量在0.5～4 h差异不显著,但在8 h时HL+CRH组显著低于CP+CRH组.H89预孵育后细胞IL-10含量在1、4、8 h显著下降,与CRH组比较差异显著(P<0.01);在4、8 h低于正常对照组水平(P<0.05).PKAi(6-22)amide预孵育细胞后,IL-10含量在0.5～8 h下降,与正常对照组以及CRH组比较差异非常显著(P<0.01).结论 CRH可通过CRHRI促进巨噬细胞分泌产生抗炎因子IL-10,其与cAMP/PKA信号通路密切相关.

关键词：促肾上腺皮质激素释放激素、巨噬细胞、IL-10、CRHR、cAMP/PKA

所属期刊栏目：31

分类号：R392-33;R392.12;R977.11

在线出版日期：2010-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2228-2231