MDR相关新基因CA916798真核表达载体的构建及其对H446细胞增殖的影响

摘要：

目的 构建新基因CA916798真核表达载体,并观察其对H446增殖的影响.方法 以人A549细胞总RNA为模板,用RT-PCR技术扩增获得CA916798开放阅读框序列,连接入pBluescriptⅡSK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将CA916798开放阅读框序列定向连接到真核表达载体pQE-Trisystem中,构成pQE-Tri-CA916798,将pQE-Tri-CA916798转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,脂质体转染人小细胞肺癌细胞系H446细胞,选取稳定转染不同质粒的H446细胞,采用MTT绘制细胞增殖曲线,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率.结果 扩增出CA916798开放阅读框序列,大小约为350 bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致,测序结果完全正确.转染了pQE-Tri-CA916798的H446细胞顺铂作用后增殖速度加快,凋亡率下降.结论 成功构建了pQE-Tri-CA916798真核表达质粒,并初步证实了其与顺铂诱导的肺癌多药耐药相关.

关键词：肺癌多药耐药相关基因、CA916798基因、H446细胞、表达载体

所属期刊栏目：29

分类号：R394-33;R730.23;R734.2

资助基金：国家自然科学基金30470773

在线出版日期：2008-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2315-2318