嵌合跨膜型人CD55基因的重组逆病毒表达质粒的构建

摘要：

目的 构建嵌合跨膜型CD55基因的重组逆病毒表达质粒。方法 采用PCR技术扩增编码CD55信号肽及成熟蛋白胞外区（-34-304aa）的DNA片段，双侧引入EcoRⅠ、SspⅠ位点，与编码CD46分子的跨膜区及膜内区（270～350aa）的DNA片段的5’末端自身的StuI位点连接，构建嵌合跨膜型CD55DNA片段，序列测定后将此嵌合CD55片段与pLXSN逆病毒载体连接构建重组表达质粒，酶切鉴定插入片段的方向。结果 DNA序列测定证实所构建的嵌合跨膜型CD5DNA阅读框完整、连接部位序列正确；HindⅢ酶切鉴定得到了正向插入的CD55TM-pLXSN重组表达质粒。结论 我们成功构建了嵌合跨膜型CD55DNA片段及含此片段的重组逆病毒表达载体CD55TM-pLXSN，为进一步在真核细胞中表达嵌合分子，比较研究GPI锚固型CD55分子与细胞活化信号转导的关系建立良好对照并为应用跨膜型的CD55分子对PNH进行基因治疗奠定了分子生物学基础。

关键词：CD55、嵌合跨膜型分子、重组逆转录病毒表达载体

所属期刊栏目：23

分类号：R394.3

资助基金：国家自然科学基金39630296

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：48-51