限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切条件的优化

摘要：

目的：探讨KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。方法 KpnⅠ和EcoRⅠ不同的酶切体系，酶切含有上述两种限制性内切酶酶切位点的载体pEGFP-Ano2，DNA琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果，以获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。结果50μL酶切体系，KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的适宜条件：首先在1×L缓冲液情况下，应用1μL KpnⅠ酶切1μg质粒1 h，再加入1×H缓冲液和0．01％BSA，应用1μL EcoRⅠ继续酶切1 h。结论获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切质粒的适宜条件，为今后应用KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切实验提供科学的参考依据。

关键词：KpnⅠ、EcoRⅠ、双酶切、优化、DNA琼脂糖凝胶电泳

分类号：Q-33(生物科学的研究方法与技术)

资助基金：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目2013-351；吉林省大学生创新创业训练计划856号；吉林医药学院大学生科研项目2012-12．

在线出版日期：2014-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：250-253