重组酶介导等温扩增技术检测鰤鱼诺卡氏菌方法的建立

摘要：

为建立一种基于重组酶介导等温扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)的快速检测鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)的方法,针对鰤鱼诺卡氏菌的特异性基因组片段,设计重组酶介导扩增引物,通过检测 7 株鰤鱼诺卡氏菌近缘菌和 9 种水产养殖过程中常见病原菌,筛选出特异性RAA检测引物,并通过将含有目的片段的重组质粒进行梯度稀释以分析该检测方法的灵敏度,最后采用RAA方法检测患病鱼、健康鱼及 11 种不同来源的鰤鱼诺卡氏菌菌株,以评价该检测方法的应用性和覆盖度.结果表明:本研究中设计的引物仅针对鰤鱼诺卡氏菌可以扩增出目的条带,检测灵敏度为 100 pg/μL,人工感染鰤鱼诺卡氏菌的杂交鳢(Channa maculate♀×C.argus♂)肝脏、体肾和脾脏等组织基因组DNA能够扩增出阳性条带,不同来源的鰤鱼诺卡氏菌菌株可以扩增出阳性条带.研究表明,本研究中所建立的鰤鱼诺卡氏菌重组酶介导等温检测方法具有准确、简便的特点,可对鰤鱼诺卡氏菌进行快速检测.

关键词：鰤鱼诺卡氏菌、重组酶介导等温扩增(RAA)、快速检测

所属期刊栏目：38

分类号：S943(水产保护学)

资助基金：国家重点研发计划;广东省自然科学基金项目;广东省重点领域研发计划项目;深圳大鹏新区科技创新和产业发展专项

在线出版日期：2023-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：104-111