10.16535/j.cnki.dlhyxb.2020-023
太平洋鳕抗菌肽Hepcidin基因克隆及体外表达研究
为揭示太平洋鳕Gadus macrocephalus抗菌肽Hepcidin(GmHep)的分子结构和表达特性,利用qPCR法对平均体质量为2.438 kg鳕不同组织和发育早期的GmHep表达模式进行了探讨,分别构建了原核(pET-32a-GmHep)和真核(pEGFP-GmHep)表达载体,研究了GmHep的体外表达特点.结果表明:Gm-Hep基因开放阅读框长为297 bp,编码98个氨基酸,蛋白相对分子质量为10833.56,该肽N端具22个氨基酸残基的信号肽,成熟肽含有8个半胱氨酸残基、4个二硫键;氨基酸序列比对发现,GmHep与大西洋鳕Hepcidin同源性最高(93％),但与其他鱼类Hepcidin同源性较低(小于60％),预示其功能具有独特性;GmHep在肝脏中的表达量显著高于其他组织(P<0.05),且GmHep在5、10、30、37、40日龄仔稚鱼中均有表达(P<0.05);GmHep体外诱导表达优化条件为IPTG浓度0.01 mmol/L、30℃、诱导4 h;Gm-Hep在EPC细胞系中主要定位在细胞质中.研究表明,本研究成功构建了两种GmHep体外表达载体,确定GmHep为肝分泌型,且在太平洋鳕发育早期发挥一定作用.
太平洋鳕、抗菌肽、原核表达、亚细胞定位
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Q786(基因工程（遗传工程）)
辽宁省高等学校创新人才项目LR2016009;辽宁省教育厅科研项目JL2019021,QL201702
2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
83-88
