虹鳟致病性杀鲑气单胞菌的分离鉴定及其毒力因子的检测

摘要：

为研究虹鳟Oncorhynchus mykiss致病性杀鲑气单胞菌Aeromonas salmonicida的致病机理,利用微生物学及分子生物学方法,从患皮肤溃疡病的虹鳟病灶处分离纯化获得1株优势菌株RBWF-1,通过人工感染试验证实其具有较强的致病性.结果表明:菌株RBWF-1对虹鳟的半致死浓度(LD50)为5.5×106 CFU/mL;通过对菌株RBWF-116S rDNA基因序列扩增、 测序及Blast对比,发现其与杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种Asalmonicida subsp.masoucida菌株NBRC 13748及无色亚种A.salmonicida subsp.achromogens菌株NCIMB 1110的16S rDNA基因序列同源性最高,一致性均为99.6％;构建系统发育树显示,菌株RBWF-1与杀鲑气单胞菌杀鲑亚种A.salmonicida subsp.salmonicida、 杀日本鲑亚种、 无色亚种和史氏亚种A.salmonicida subsp.smithia聚为一支;为进一步明确菌株的分类地位,利用Biolog微生物鉴定系统结合传统生理生化试验对菌株RBWF-1各项理化指标进行检测,经对比,与杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种吻合度最高,因而判断该分离株为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种;同时,对分离菌株的气溶素、 溶血素、 封闭带毒素、DNA酶、 丝氨酸蛋白酶、 磷脂酶、S层蛋白7个毒力相关基因进行了PCR检测,检测结果均呈阳性;酶活性检测结果显示,菌株RBWF-1胞外产物具有蛋白酶、 淀粉酶、 脂酶、DNA酶和溶血活性.本研究结果可为中国虹鳟养殖过程中杀鲑气单胞菌的感染特征、 分类鉴定和疫苗研制提供必要的数据和参考.

关键词：虹鳟、杀鲑气单胞菌、致病性、毒力因子、胞外产物

所属期刊栏目：33

分类号：S941.4(水产保护学)

资助基金：山东省重点研发计划项目2016CYJS04A01-3,2018GHY115033;山东省海洋与渔业科技创新计划项目2017YY15

在线出版日期：2018-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：435-443