拟穴青蟹抗菌肽SCY2在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性

摘要：

为深入研究拟穴青蟹Scylla paramamosain阴离子抗菌肽SCY2的抗菌活性,将抗菌肽SCY2的成熟肽序列与毕赤酵母Pichia pastoris的pPIC9K质粒连接,构建了分泌型表达载体pPIC9K-SCY2,用电击法将其转化至毕赤酵母GS115菌株中,经甲醇诱导表达和亲和纯化后获得目的蛋白,并进行质谱鉴定和抗菌活性分析.结果表明:本研究中成功构建了重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K-SCY2,用0.5%甲醇诱导表达24 h后,分泌表达上清液中获得了相对分子质量约11000的稳定表达产物,与预期的抗菌肽SCY2成熟肽的大小相符;纯化后的目的蛋白经质谱鉴定,有6个肽段的氨基酸序列与预期一致;抗菌活性结果表明,抗菌肽SCY2能抑制革兰氏阳性菌生长,对被测的革兰氏阴性菌无抑杀活性 (>50 μmol/L);抗菌肽SCY2同抗生素进行协同抗菌试验,发现SCY2与四环素协同使用对荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens的抑杀存在协同作用,SCY2与青霉素协同使用对施氏假单胞菌Pseudomonas stutzeri的抑杀具有增强作用.研究表明,较低浓度的抗生素与抗菌肽协同使用可有效地减少抗生素的使用,降低食品中抗生素的残留风险.

关键词：拟穴青蟹、抗菌肽SCY2、毕赤酵母、抗菌活性、协同作用

所属期刊栏目：33

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目41676158;福建省科技重大专项2017NZ0004/2017NZ0004-1;福建省中青年教师教育科研项目JAT170008

在线出版日期：2018-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：151-157