10.16535/j.cnki.dlhyxb.2016.02.003
口虾蛄卵黄蛋白原(Vg)基因的初步研究
为研究口虾蛄 Oratosquilla oratoria 卵黄蛋白原( vitellogenin, Vg)基因,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆口虾蛄Vg基因cDNA全长序列(GenBank登陆号: KR422400),并应用相对实时荧光定量PCR技术检测雌雄口虾蛄不同组织、不同发育时期卵巢Vg mRNA的表达量。结果表明:口虾蛄Vg基因全长7727 bp,其中5'端非编码区为36 bp,开放阅读框( ORF)为7521 bp,3'端非编码区为170 bp,共编码2506个氨基酸;预测的氨基酸序列中存在1个长度为20个氨基酸的信号肽,1个类似于枯草蛋白酶的内切蛋白酶识别位点( RSKR),3个潜在的N-连接糖基化位点,1个在无脊椎和脊椎动物卵黄蛋白原中都比较保守的KALGNVG基序;对其结构域分析表明,口虾蛄Vg蛋白含有4种保守结构域,分别为卵黄蛋白原N端结构域( Vitellogenin N )、血管性血友病因子( vWFD )和两种未知功能结构域( domain of un-known function) DUF1943与DUF1081;经NCBI BLASTP同源性比较,口虾蛄Vg氨基酸序列与其他甲壳类的相似性为46%~52%;系统发育分析结果显示,口虾蛄Vg单独聚为一支;实时定量PCR结果显示,口虾蛄Vg基因在性腺和肝胰腺中均有表达,在肌肉中均不表达,卵巢中Vg mRNA的表达量显著高于其他组织(P<0.05),且口虾蛄Vg mRNA的相对表达量随着卵巢的发育不断增加(P<0.05),在成熟期时达到最高值,随后显著下降, Vg mRNA表达量在卵巢中的变化规律可以作为了解口虾蛄性腺发育的有效指标。本研究结果为口虾蛄Vg蛋白的功能研究奠定了基础。
口虾蛄、卵黄蛋白原 (Vg)、分子克隆、荧光定量PCR、表达模式
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S917.4;S966.1(水产基础科学)
辽宁省教育厅一般项目L2015083;辽宁省科学技术计划项目2014203016;农业部北方海水增养殖重点实验室开放课题2014-MSENC-KF-14;大连海洋大学博士启动基金资助项目2014017349
2016-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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