太平洋鳕神经坏死病毒衣壳蛋白（CP）的原核表达及条件优化

摘要：

为深入研究太平洋鳕Gadus macrocephalus神经坏死病毒( Pacific cod nervous necrosis virus, PCNNV)衣壳蛋白(capsid protein, CP)的功能,将PCNNV cp基因连接到pET-32a原核表达载体中,构建原核表达重组载体pEVCP,将其转化至大肠杆菌E. coli BL21(DE3)表达系统中进行融合表达,对诱导剂 IPTG浓度、诱导时间和温度等诱导表达条件进行优化,采用 SDS-PAGE 及质谱技术鉴定表达产物。结果表明：本研究中成功构建了重组载体pEVCP,表达的目的蛋白相对分子质量约为55000；目的蛋白经质谱鉴定,有6个肽段的氨基酸序列与预期一致；对重组菌株pEVCP/BL21的最佳诱导条件为IPTG浓度0.1 mmol/L、最佳诱导时间3 h、温度30℃。本研究结果可为后续冷水鱼类病毒疫苗的研制及病毒快速检测试剂盒的研发奠定基础。

关键词：太平洋鳕、神经坏死病毒、衣壳蛋白、原核表达

所属期刊栏目：31

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31302202;国家“863”计划项目2012AA10A413;农业部北方海水增养殖重点实验室开放课题2014-MSENC-KF-12;辽宁省教育厅科研项目L2013276

在线出版日期：2016-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：117-123