红鳍东方鲀白介素15的原核表达及其活性测定

摘要：

为了开发红鳍东方鲀Takifugu rubripes免疫基因及其重组表达,生产重组免疫因子蛋白,通过提取红鳍东方鲀肾脏组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增得到白介素15(interleukin15,IL15)基因序列,将IL15成熟肽序列与原核表达载体pET-32a(+)连接,成功构建重组表达载体(重组子)pET-32a(+)-IL15,并将其重组子转化至Escheria coli BL21 (DE3)感受态细胞中获得重组表达IL15的基因工程菌,再经IPTG诱导,pET-32a(+)-IL15在BL21中得到了融合表达.结果表明:通过对表达产物的纯化和Western Blotting检测,红鳍东方鲀IL15在大肠杆菌中的表达量较高,蛋白浓度为294.6 μg/mL;用MTT法对该蛋白进行活性鉴定显示,加入稀释10倍和100倍的重组红鳍东方鲀IL15蛋白时,CTLL-2细胞的增殖率相对较高,分别为71％和73％.研究表明,重组红鳍东方鲀IL15蛋白具有体外促进CTLL-2细胞增值的能力.

关键词：红鳍东方鲀、白介素-15、原核表达、活性鉴定

所属期刊栏目：30

分类号：S965.225(水产养殖技术)

资助基金：国家海洋公益性行业科研专项201405003-2;大连市科技计划项目2014B11NC091

在线出版日期：2016-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：598-603