刺参26S蛋白酶体S7亚基基因的克隆与组织表达分析

摘要：

应用RACE法从刺参Apostichopus japonicus体腔细胞中克隆出26S蛋白酶体组成19S亚复合体亚基之一的S7亚基基因(GenBank登录号:JQ922514).该基因的cDNA序列全长为2 445 bp,其中5'UTR为70bp,3'UTR为1 070 bp,开放阅读框为1 305 bp,编码435个氨基酸;保守区具有典型的ATP结合和水解基序,氨基酸序列分别为GPPGTGKT和DEID,具有MAT和VRPGRLDR的RNA/DNA螺旋酶的特征性基序;刺参26S蛋白酶体S7亚基基因与紫海胆的氨基酸序列同源性最高(95％),与脊椎动物、节肢动物的同源性较高(88％～89％),与线虫、拟南芥和酵母同源性较低(85％、77％和73％);S7亚基编码的蛋白没有信号肽,也没有跨膜结构域,为非跨膜蛋白,定位于细胞中的液态基质中.采用实时定量PCR方法检测了26S蛋白酶体S7亚基基因在刺参5种组织中的表达情况,结果显示,在肠、呼吸树、表皮、体腔细胞、纵肌中26S蛋白酶体S7基因均有明显表达,且体腔细胞中表达量最高,其次是纵肌和肠,在体壁和呼吸树中表达量较低.本研究中首次在刺参体内发现并克隆了26S蛋白酶体S7亚基基因,同时采用Real-timePCR技术对该基因的表达部位进行了研究,所得结果将为研究棘皮动物蛋白质代谢途径提供新的着眼点,为刺参生理功能的调控研究奠定了基础.

关键词：刺参、26S蛋白酶体S7亚基、基因克隆、组织表达

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分类号：S917.4(水产基础科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30371099;辽宁省教育厅实验室专项2008S064

在线出版日期：2014-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：528-534