罗非鱼热休克蛋白70在毕赤酵母中的表达与纯化

摘要：

以尼罗罗非鱼血液mRNA反转录获得编码罗非鱼Hsp70完整cDNA,重组构建罗非鱼真核表达载体pPIC9K/rtHsp70;在毕赤酵母Pichia pastoris KM71中表达重组罗非鱼的热休克蛋白70(rtHsp70),对表达上清液进行SDS-PAGE及Western blot分析;采用亲和层析、HiTrap Desalting预装柱脱盐纯化目的蛋白.结果表明:克隆至pMD载体上的基因与目的基因完整编码区序列完全一致;诱导表达上清液经SDSPAGE及Western blot分析,上清液中蛋白条带大小与目的蛋白相对分子质量大小一致;每升诱导上清液可以获得约2 mg纯化蛋白.本研究中获得的rtHsp70毕赤酵母工程菌及纯化的rtHsp70为后期rtHsp70-肽疫苗研究奠定了基础.

关键词：重组罗非鱼热休克蛋白70(rtHsp70)、基因表达、毕赤酵母

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分类号：Q813.2(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家社会公益研究项目2060302 GXIF-2008-03;国家科技支撑计划项目2008BADB9B04

在线出版日期：2011-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：58-62