用链球菌疫苗免疫罗非鱼前后其差异表达基因的鉴定与分析

摘要：

采用抑制性差减杂交技术(SSH)成功构建了罗非鱼Oreochromis nilotica被链球菌Streptococcus iniae疫苗免疫前后正、反两个淋巴细胞cDNA差减文库,富集了免疫过程中表达谱发生变化的淋巴细胞基因,并对文库进行了斑点杂交筛选、测序和ESTs初步分析.结果表明:文库富集了高丰度的差异表达基因,阳性率较高.正向文库中筛选得到21个免疫期间表达丰度上调的基因,其中1个基因与罗非鱼已知基因具有相似性,10个基因与其他鱼类已知基因相似,1个基因与其他物种已知基因具有相似性,9个为未知新基因;负向文库中筛选得到24个免疫期间表达丰度下调的基因,其中3个与罗非鱼已知基因具有相似性,15个与其他鱼类已知基因相似,6个为未知新基因.进一步功能注解发现,正向文库功能基因包括免疫信号传导相关蛋白、防御相关蛋白、肿瘤免疫相关蛋白和淋巴细胞相关蛋白,这些基因免疫后表达丰度升高,提高了机体免疫抵抗力.负向文库功能基因包括细胞免疫相关蛋白、感染相关蛋白和肿瘤发生相关蛋白,这些基因免疫后表达丰度降低,可以降低机体感染和发病几率.

关键词：罗非鱼、链球菌、疫苗、差减文库、免疫相关基因、斑点杂交筛选

所属期刊栏目：24

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家科技支撑计划项目2008BADB9B04;农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室开放基金资助项目BZ2007-05;广西科技计划应用基础研究项目桂科基0832029

在线出版日期：2010-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：379-386