用两种ELISA方法快速检测大菱鲆细菌性出血性败血症的病原菌

摘要：

以大菱鲆 Scophthalmusmaximus 出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌 Edwardsiella tarda 为抗原,从免疫家兔体内获得高免疫血清,建立快速检测大菱鲆出血性败血症病原迟钝爱德华氏菌的间接ELISA技术.采用棋盘滴定法确定间接ELISA抗原和抗血清的最适工作浓度分别为107个/mL和1:20 000;最低检测菌浓度为104个/mL;抗血清与其他细菌标准菌株的交叉反应结果均为阴性,表明该方法具有较高的特异性.将该方法优化后检测了19尾人工感染出血性败血症并发病的大菱鲆和19尾健康的大菱鲆,阳性检测率分别为89.5%和的10.5%.同时在间接 ELISA 方法的基础上建立竞争 ELISA 检测技术,结果表明:理想的包被抗原浓度为107个/mL,兔抗血清的工作浓度为1:20 000,酶标抗体工作浓度为1:1 000,可测最适范围为2×105～2 X 108个/mL,最低检测菌浓度为2 X 105个/mL,得到回归方程y=-0.3811x+2.2335,R2=0.992.

关键词：大菱鲆出血性败血症、迟钝爱德华氏菌、19接ELISA技术、竞争ELISA技术

所属期刊栏目：23

分类号：S943(水产保护学)

资助基金：辽宁省教育厅高等学校科研计划项目2004D239

在线出版日期：2008-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：252-257