大豆NIN和NLP基因生物信息学分析及敲除载体构建

摘要：

为促进大豆NLP家族基因突变大豆材料的获得及大豆NIN和NLP基因功能的研究,本研究对大豆NIN和NLP基因进行生物信息学分析,通过CRISPR/Cas 9基因编辑技术构建基因敲除载体,并且通过大豆毛根转化实验验证靶点的有效性.结果表明:大豆基因组中一共存在4个NIN基因和10个NLP基因家族成员,这些基因都具有RWP-RK和PB1两个保守结构域.亚细胞定位预测表明所有成员都定位在细胞核中,此外GmNIN1 b和GmNIN2a 还定位于叶绿体.GmNIN1a/b、GmN1N2a/b、GmNLP2a/b及GmNLP3b在根瘤中的表达量相对较高,推测这些基因可能对结瘤过程具有重要的调控功能.成功构建了NLP4和NLP5两个敲除载体,得到可敲除GmNLP4a/b的3个有效靶点和敲除GmNLP5a/b的2个有效靶点.本研究获得了大豆NIN和NLP基因家族的生物信息学依据和创制GmNLP4a/b和GmNLP5a/b基因突变体的技术依据.

关键词：大豆、根瘤、NLP基因、生物信息学分析、CRISPR/Cas 9基因编辑技术、基因敲除载体、GmNLP4a/b、GmNLP5a/b

所属期刊栏目：42

分类号：Q78;Q943.2;S511

资助基金：广东省基础与应用基础研究重大项目2019B030302006

在线出版日期：2023-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1-11