转HAL1基因大豆侧翼序列分析及特异性检测方法研究

摘要：

为方便HAL1转基因大豆的研究和检测,以转HAL1基因大豆T3代基因组DNA为模板,使用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)方法分离其外源基因插入位点的侧翼序列,获得了插入片段DNA序列(T-DNA)的左翼序列和右翼序列.通过比对大豆基因组序列确定其整合位点,确定了HAL1基因的T-DNA在大豆基因组1号染色体非编码区49468395位点以单拷贝插入,转基因事件不影响大豆基因组功能基因的正常表达,而且在200 mmol·L-1NaCl盐胁迫下转基因植株生长力明显强于对照材料.蛋白定量检测结果表明,在叶片中蛋白含量最高可达0.03 mg·g-1,在根茎花中也有表达,但是含量较低.根据整合位点处的左右侧翼序列设计两对特异性PCR检测引物,PCR检测结果显示只有转HAL1基因大豆阳性材料才能扩增出926和816 bp DNA片段.本研究建立的转HAL1基因大豆特异性定性检测方法,对转基因大豆的研究具有重要的意义,也为大豆转基因受体材料的管理与检测提供参考.

关键词：大豆、转基因、侧翼序列分析

所属期刊栏目：37

分类号：S565.1(经济作物)

资助基金：农业部转基因生物新品种培育科技重大专项2014zx08004-002-001

在线出版日期：2018-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：32-38