大豆悬浮细胞培养及作为外源基因转化受体的研究

摘要：

以吉林小粒7号大豆品种为材料,切取无菌幼苗下胚轴诱导愈伤组织,初步建立了大豆悬浮细胞系,测定不同硼酸浓度下悬浮细胞生长变化;采用农杆菌介导法对大豆悬浮细胞进行外源GUS基因的转化,先通过不同程度的超声处理确定最佳超声时长,然后在最佳超声处理时长的基础上,探讨了硼酸浓度对转化效率的影响;最后采用PCR和Southern blot杂交对抗性愈伤做分子鉴定.结果表明:大豆悬浮细胞正常生长硼酸浓度在2.0～10 mg·L-1,过高或过低均会抑制大豆细胞正常的生长,高于100 mg·L-1时抑制作用最显著.但在转化过程中,适当增加硼酸浓度(10 ～30 mg· L-1)则能够提高悬浮细胞的转化效率,并且有助于转化组织的筛选,借以3 min超声的辅助作用,30 mg·L-1硼酸浓度下转化效率达到1 mg转化细胞团中含28个转化体.

关键词：大豆、悬浮细胞、硼酸、农杆菌、超声、转化

所属期刊栏目：34

分类号：S565.1(经济作物)

资助基金：吉林省科技发展计划重点项目20060202.

在线出版日期：2015-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：36-41