大豆GmbZIP71基因的克隆及EMSA分析

摘要：

通过PCR扩增的方法从大豆品种Harosoy中克隆到1个新的bZIP基因(GmbZIP71),基因表达分析表明GmbZIP71在叶片、生长点、花、花芽、荚和根等多个器官中表达.将GmbZIP71构建到原核表达载体pET29b上,导入大肠杆菌BL21 (DE3)中,对其进行IPTG诱导.结果表明:在IPTG浓度为0.25 mmol·L-1,诱导时间为4h,诱导温度为28℃时,重组蛋白得到表达,分子量大约为48 kDa,SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在,用His蛋白纯化系统回收得到GmbZIP71-His重组蛋白,EMSA(electrophoretic mobility shift assay)实验表明GmbZIP71重组蛋白可以在体外与ACGT顺式作用元件结合.

关键词：大豆、bZIP、原核表达、EMSA

所属期刊栏目：34

分类号：S565.1(经济作物)

资助基金：国家自然科学基金31071445,31171579,31201222和31371643;黑龙江省自然科学基金ZD201001,JC201313;中国科学院“百人计划”.

在线出版日期：2015-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：32-35,41