大豆RNA依赖的RNA聚合酶基因GmRDR1的克隆与表达特性分析

摘要：

为了寻找大豆抗病新基因,培育大豆新型抗性品种,利用同源克隆的方法从大豆品种科丰1号中分离出1个新的GmRDR1基因,并对其进行序列分析,组织表达、抗逆境胁迫表达分析及该基因的亚细胞定位研究.结果表明:GmRDR1基因位于大豆基因组的第2号染色体,基因全长为3 956 bp,其中ORF为3 378 bp,编码1 125个氨基酸,相对分子量和等电点分别为279.72×103和4.63;GmRDR1含有RDRs家族的保守序列“DLDGD”;该基因在所有被检测组织中均表达,并且在叶中的表达量最高;荧光定量结果发现:在大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)处理下,GmRDR1在抗病材料科丰1号中的表达量显著高于感病材料南农1138-2.盐及干旱胁迫下,48 h之内,该基因的表达量明显升高,SA诱导条件下该基因在6h出现了早期响应,冷害处理下24 h表达量出现了突然的升高.GmRDR1基因的亚细胞定位结果表明:该基因所编码的蛋白定位在细胞核里.根据以上结果判定GmRDR1基因参与了大豆对SMV的抗性反应,并且能够强烈响应盐和干旱的胁迫,因此该基因在大豆抗逆分子育种中具有较好的应用价值.

关键词：大豆、基因克隆、组织表达、荧光定量PCR、生物胁迫、非生物胁迫、亚细胞定位

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分类号：S565.1(经济作物)

资助基金：转基因生物新品种培育重大专项2011ZX08004-004;江苏省农业科技自主创新项目cx133001;江苏省自然科学基金BK2012374.

在线出版日期：2015-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：19-25