大豆GmSOT1基因克隆、载体构建及初步表达研究

摘要：

磺酸基转移酶(sulphotransferase,简称SOT)是硫代葡萄糖苷(glucosinolate,简称硫苷)核心结构合成途径中的关键酶之一.本研究采用反向遗传学方法从大豆基因组中克隆GmSOT1基因并对其功能进行初步研究.首先采用PCR方法扩增大豆GmSOT1基因,并将其连接到pRNAi载体上的35S(CaMV35S)启动子后面;将35S:GmSO T1基因片段从pRNAi载体上双酶切下来,连接到植物双元表达载体pCAMBIA2301的多克隆位点上,且命名为pCAMBIA2301-35S:GmSOT1;采用根癌农杆菌介导的遗传转化方法转化大豆成熟胚,并考察其初步表达结果.结果表明:大豆GmSOT1基因的编码区(coding sequences,简称CDS)由1 014 bp的核苷酸组成,编码一个长度为337个氨基酸残基的蛋白质;35S:GmSOT1被成功导入大豆胚细胞,初步观察发现GmSOT1过量表达导致大豆胚根明显膨大弯曲.

关键词：大豆、磺酸基转移酶、硫代葡萄糖苷、基因克隆、载体构建

所属期刊栏目：33

分类号：S565.1(经济作物)

资助基金：国家高技术研究发展计划“863计划”2013AA102704.

在线出版日期：2015-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：815-819