野生大豆ISSR体系的优化及其在远缘杂交后代鉴定中的利用

摘要：

以内蒙古野生大豆为材料,运用5因素5水平正交试验设计对ISSR-PCR反应体系中DNA模板、Taq酶、引物、dNTPs和Mg2+用量进行优化试验,之后利用优化后的ISSR-PCR体系对内蒙古野生大豆及其与栽培大豆的杂交后代进行遗传关系研究.正交试验结果表明,各因素对野生大豆ISSR-PCR反应影响大小依次为Taq酶＞Mg2+＞引物＞模板DNA=dNTPs,最佳反应体系为模板DNA 50 ng、Taq酶0.5U、引物(10μmol·L-1)1.0 μL、Mg2+(25 mmol·L-1)2.0 μL及 dNTPs (25 mmol·L-1 each) 3.0 μL,2μL 10×PCR buffer、ddH20补足至20 μL.以10个引物对供试材料进行扩增,共得到条带109个,多态性百分率为60.23％,其中引物S23可以将所有供试材料进行区分.基于ISSR标记的聚类分析将13个供试材料划分为3类,S001、S002、2、5、8-1和84为第一类,29、SF、NY、ZS、0004和PZ为第二类,Y为第三类.

关键词：野生大豆、正交设计、ISSR、杂种鉴定

所属期刊栏目：32

分类号：S565.1(经济作物)

资助基金：内蒙古应用技术研究与开发项目20091402;内蒙古自然科学基金2010MS0511

在线出版日期：2013-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：459-466