大豆幼荚全长cDNA文库的构建及鉴定分析
构建大豆幼荚全长cDNA文库,可为克隆与大豆产量相关基因,培育高产大豆新品种奠定基础.以吉农18大豆幼荚突变体为材料,提取大豆幼荚总RNA,反转录成单链cDNA,LD-PCR方法合成双链cDNA; PGR产物经蛋白酶K消化、Sfil酶切后,采用CHROM SPIN-400柱分级分离,回收500 bp以上的cDNA组分.以λTriplE×2载体连接并进行体外包装,构建吉农18大豆幼荚全长cDNA文库.经检测研究构建的大豆幼荚cDNA原始文库滴度达到1.5 ×106pfu·mL-1,重组率达92％.扩增的文库滴定达到2.6×108 pfu·mL-1,重组cDNA片段长度在500 bp以上.结果显示构建的大豆幼荚全长cDNA文库符合高质量文库的标准,可用于进一步开展相关基因的克隆及分子生物学研究.
大豆、幼荚、全长cDNA文库、SMART技术
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S336(作物遗传育种与良种繁育)
吉林省科技厅科技支撑重点项目20090203;吉林省科技厅科技指导计划项目201101111
2013-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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