10.3969/j.issn.1000-9841.2012.02.008
大豆胞囊线虫热激蛋白基因Hsp70的克隆与原核表达
采用RT-PCR技术结合基因组步移技术,从大豆胞囊线虫(Heterodera glycines)中克隆了热激蛋白70基因(Hsp70)的全长cDNA序列(Hg-Hsp-70),全长1953bp,GenBank登录号为FJ816100.1.碱基序列分析结果表明,该序列含有9个外显子与8个内含子,与其它线虫具有较高的同源性.氨基酸序列分析表明,该基因编码650个氨基酸,相对分子量为70.7 kD,具有2个Hsp70基因家族的签名序列,与其它线虫的该基因氨基酸序列具有很高的同源性.构建了原核表达载体Hsp70pEASY-El,采用IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳结果表明,当IPTG终浓度为0.2~1.2 mmol·L-1时均能显著诱导表达;以终浓度0.8 mmol·L-1的IPTG诱导5h蛋白表达量达到最大值.
大豆胞囊线虫、热激蛋白70、克隆、表达
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S565.1(经济作物)
现代大豆产业技术体系资助项目;农业部公益性行业农业科研专项200903040-03
2012-07-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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