土壤镰孢菌Real-Time QPCR定量方法的建立及应用

摘要：

基于镰孢菌ITS序列,设计一对应用于实时荧光定量PCR(Real-Time QPCR)反应的镰孢菌属特异性引物TS和TR,并建立了相应的Real-Time QPCR体系.应用该反应体系,绝对定量了无肥(NF)、化肥(NP)以及化肥配施有机肥(NPM)等3种施肥措施下大豆田土壤镰孢菌DNA含量.结果表明:引物TS和TR对镰孢菌属真菌有较好的特异性;Real-Time QPCR反应的扩增曲线中各梯度浓度标准品的循环阈值(Ct值)间隔均匀,熔点曲线无杂峰,标准曲线的相关系数R2=0.993,斜率为-0.2927;在大豆生育时期的苗期,NF、NP及 NPM 措施下土壤镰孢菌总DNA每克干土中含量分别为18.33、44.61和140.83 pg,且NPM 措施含量极显著高于NF 及 NP 措施(P＜0.01).

关键词：镰孢菌、实时荧光定量 PCR、绝对定量

所属期刊栏目：29

分类号：S154.3(土壤学)

资助基金：中国科学院知识创新工程重大资助项目KSCX1-YW-09-09;大豆生物学省部共建教育部重点实验室开放基金资助项目SB08B01;国家"十一五"科技支撑计划资助项目2006BAD21B01-15

在线出版日期：2010-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：655-658,662