10.3969/j.issn.1005-9369.2020.10.006
转录因子KLF7对IL-6基因的转录调控分析
选取小鼠IL-6基因转录起始位点上游2 000 bp序列作为启动子序列,采用在线生物信息学软件分析转录因子结合位点;利用PCR扩增小鼠IL-6基因启动子及其5'端截短突变体片段,构建相应的荧光素酶报告基因重组质粒,转染3T3-L1细胞后检测报告基因活性;采用共转染分析转录因子KLF7对IL-6基因启动子活性的影响;利用siRNA技术探究敲低KLF7对细胞内源性IL-6基因表达的影响.生物信息学分析显示,小鼠IL-6基因启动子区存在5个Sp1/KLFs结合位点;报告基因分析和定点突变分析发现,KLF7通过IL-6基因启动子区-98至-89 bp处(CCCCACCCAC)发挥调控IL-6基因启动子活性的作用;Real-timeRT-PCR和Western blot分析显示,敲低KLF7抑制细胞内源性IL-6基因表达.文章首次发现KLF7直接调控IL-6基因表达,研究结果对揭示KLF7在脂肪生成中的作用机制具有重要意义.
鼠、KLF7、IL-6、启动子、转录调控
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S831.2(家禽)
国家自然科学基金项目31872346
2020-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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