高效、快速提取高质量稻曲病菌基因组DNA方法

摘要：

稻曲病菌[Ustilaginoidea virens(Cooke)Takahashi]培养期间菌丝生长缓慢,且产生大量次生代谢产物,严重影响提取稻曲病菌基因组DNA质量与效率.将一步式提取法(Rapid one-step extraction,ROSE)增加异丙醇、NaAc冷冻沉淀DNA和70％无水乙醇漂洗DNA两个步骤,建立一种高效、快速提取高质量稻曲病菌基因组DNA的方法,即改良ROSE法,并将该方法与稻曲病菌基因组DNA传统提取方法(CTAB法、SDS法、试剂盒法和改良脲素法)在提取步骤、DNA纯度与得率、PCR反应和酶切效率等方面加以比较.结果表明,5种方法均得到稻曲病菌基因组DNA,但改良ROSE法同时具有无毒、环保、低成本、快速获取高质量DNA的优点.改良ROSE法s可用于稻曲病菌分子标记、遗传图谱构建等需短时间内快速获取DNA的分子试验研究,也适用于稻曲病菌基因精细定位、克隆和测序等需高质量DNA的分子试验.

关键词：稻曲病菌、基因组DNA、改良ROSE法、高效

所属期刊栏目：51

分类号：S435.111.46;Q523(病虫害及其防治)

资助基金：黑龙江省自然科学基金项目;中央引导地方科技发展专项;国家重点研发计划项目;黑龙江省应用技术研究;开发计划项目;黑龙江省水稻现代农业产业技术协同创新体系项目2020

在线出版日期：2020-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7